昨日剛過“大寒",一年度的zui后一個(gè)節(jié)氣。雖然近期各地溫度有所降低,但對于抗體的保存不能夠因此忽略。在今天的內(nèi)容中,主要涉及到單克隆抗體、多單克隆抗體、帶標(biāo)記的抗體,針對這三大類型的抗體保存需區(qū)分對待。
一、單克隆抗體
可以保存在50%的丙三醇存放于-20℃。也可以將其保存在飽和硫酸銨于4℃或-20℃保存。多年未見有失活、細(xì)菌滋生以及氧化。而凍干法(冷凍干燥,干燥或從冰凍狀態(tài))為一些冰凍以后不穩(wěn)定抗體提供了一種替代的保存方法。在大多數(shù)情況下,凍干的抗體是存放在-20℃。雖然冷凍干燥有許多優(yōu)點(diǎn),它需要昂貴的設(shè)備和勞動(dòng)力。
二、多克隆抗體
在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而,一旦抗體被純化后,儲(chǔ)存在50%的丙三醇中于-20℃保存,即使沒有凍融,其活性的損失也可以觀察到,盡管其進(jìn)程仍然非常緩慢。即使沒有丙三醇,只要你*凍融,抗體也可以存儲(chǔ)在-20℃幾年甚至幾十年。另一個(gè)重要的事情是,該抗體濃度應(yīng)高于1毫克/毫升,因?yàn)橄〉目贵w容易失去活性而且容易造成物理吸附導(dǎo)致的損失。
三、帶標(biāo)記的抗體
一般儲(chǔ)存在黑色容器中或者用錫箔紙蓋住。
1.酶標(biāo)記抗體
堿性磷酸酶和其他酶結(jié)合物對于冷凍特別敏感,一般應(yīng)在4℃短期存儲(chǔ)。
標(biāo)記抗體長期保存是在終濃度為50%的丙三醇或乙二醇中于-20℃保存。雖然某些酶結(jié)合物 可在無保護(hù)劑的情況下于-20℃儲(chǔ)存,但必須分裝,以防止反復(fù)凍融。
2.熒光標(biāo)記抗體
熒光遇光容易分解,熒光標(biāo)記的試劑(不只是抗體)必須避光保存,其應(yīng)該存放在4℃、避免讓其凝固。
四、抗體濃度
抗體濃度過低(<1毫克/毫升)更容易發(fā)生抗體的失活以及增加物理吸附造成的損失。因此,我們都要盡量的保持抗體在儲(chǔ)存期間的高濃度,例如,1-5毫克/毫升。通常的做法是添加“載體"蛋白質(zhì),如純化牛血清白蛋白(BSA)以防止這種降解和損失。
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