本學(xué)期就要結(jié)束了,科研時(shí)節(jié)忙碌紛紛,不少客戶們正在準(zhǔn)備即將開(kāi)始的實(shí)驗(yàn)與春節(jié)后的試劑盒預(yù)購(gòu)。ELISA實(shí)驗(yàn)得以大家的喜愛(ài)是因?yàn)槠溆兄哽`敏、高特異性、準(zhǔn)確性好等特點(diǎn)。
近日,我公司何在售后服務(wù)問(wèn)題處理過(guò)程中,接到了曹老師的,曹老師說(shuō):“ELISA方法的準(zhǔn)確性一般會(huì)用LC、LC-MS或者LC-MSMS做驗(yàn)證,因?yàn)槲业姆椒ㄉ婕暗叫》肿铀幬锏难苌鷾y(cè)定,所以液相的方法達(dá)不到回收率,請(qǐng)問(wèn)有沒(méi)有其他的方法可以用來(lái)驗(yàn)證ELISA方法的準(zhǔn)確性呢?有沒(méi)有這種可能是我的藥物衍生體系本身這種方法與液相的流動(dòng)相沖突,不適合用液相去測(cè)定?"
對(duì)曹老師的疑問(wèn),上海恒遠(yuǎn)技術(shù)專(zhuān)員做出的細(xì)致的分析:
通常用ELISA方法檢驗(yàn)出來(lái)的陽(yáng)性樣品,需要用LC、LC-MS、GC-MS或者LC-MSMS做確證,因?yàn)镋LISA方法的存在約5%左右的假陽(yáng)性。究竟用上述的哪一種方法去確證其準(zhǔn)確性,是要根據(jù)被測(cè)組分的理化性質(zhì)決定的,例如組分在300度也不能夠汽化,肯定不能用GC-MS;組分結(jié)構(gòu)中有共軛,存在 n→π躍遷,π→π躍遷,一般會(huì)用HPLC紫外檢測(cè)器;若組分具有熒光或者通過(guò)衍生化反應(yīng)可以定量產(chǎn)生具有熒光的物質(zhì),則會(huì)用HPLC熒光檢測(cè)器。以此類(lèi)推,究竟用什么方法確證取決于被測(cè)組分的理化性質(zhì),而不是憑空想象。