更新時(shí)間:2022-08-08
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司經(jīng)營(yíng)上萬(wàn)種檢測(cè)試劑盒、ELISA試劑盒,酶免試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,酶聯(lián)免疫分析試劑盒,涵蓋人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、犬、雞、馬、猴、羊、豬、牛、各類植物等等種屬標(biāo)本,咨詢“人白介素8(IL-8 ) "的詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。
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一、產(chǎn)品參數(shù)規(guī)格
【產(chǎn)品名稱】:人白介素8(IL-8 )ELISA試劑盒
【檢測(cè)方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產(chǎn)品性狀】:96T/48T,盒裝液體
【貯 藏】:2-8°C
【有 效 期】:Elisa試劑盒二年,我公司Elisa試劑盒均為批次,可放心購(gòu)買。
【主要成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
【標(biāo) 本】:血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清液/組織勻漿/組織液/尿液/分泌物
【質(zhì)量承諾】:我們堅(jiān)持對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量作不斷的評(píng)估、創(chuàng)新和改善以確保您對(duì)我們產(chǎn)品的高度信任。
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
【樣品采集】:Elisa試劑盒收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
【保 質(zhì) 期】:半年(六個(gè)月)
二、實(shí)驗(yàn)原理:
Elisa試劑盒原理
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
三、ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,品種具備以下優(yōu)點(diǎn):
*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)
精確特異—特異檢測(cè)目標(biāo)分子,結(jié)果精確可重復(fù)
高度靈敏—可檢測(cè)到pg/mL級(jí)別的目標(biāo)
種類齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個(gè)種屬
優(yōu)化設(shè)計(jì)—可拆卸式96孔板(12X8),為血清、血漿、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測(cè)進(jìn)行優(yōu)化
四、人白介素8(IL-8 )ELISA試劑盒操作過(guò)程中可能出現(xiàn)的問(wèn)題和解決方法
ELISA試劑盒操作過(guò)程中可能出現(xiàn)的問(wèn)題和解決方法 | ||
問(wèn)題 | 可能原因 | 解決方法 |
顯色淡,靈敏度偏低 | 1、試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng),溫度太高 | 盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,夏季應(yīng)放冰塊降溫 |
2、試劑盒未充分平衡 | 試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開(kāi)盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。 | |
3、培養(yǎng)箱溫度不足37℃ | 注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開(kāi)啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意 | |
4、保溫時(shí)間不足 | 校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí) | |
5、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增加 | 按說(shuō)明書(shū)要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù) | |
6、移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔 | 校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔,一次性使用 | |
7、蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題 | 使用新鮮合格的蒸餾水 | |
8、底物作用時(shí)間不足 | 準(zhǔn)確定時(shí) | |
ELISA試劑盒背景深,全部呈有色 | 1、洗滌不充分,洗后未拍干,樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留 | 濃縮洗液準(zhǔn)確配制;10倍濃縮洗滌液如有結(jié)晶則應(yīng)讓結(jié)晶于室溫全部溶解后再量取稀釋;充分洗滌,*拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用,不要反復(fù)使用,否則易造成污染 |
2、樣品污染 | 樣品應(yīng)新鮮采集,或低溫保存,防止污染 | |
3、培養(yǎng)箱溫度超過(guò)37℃或反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng) | 調(diào)整培養(yǎng)箱溫度,準(zhǔn)確定時(shí) | |
4、吸嘴重復(fù)使用,未洗凈或消毒不* | 吸嘴盡可能一次性使用 | |
5、蒸餾水被污染 | 使用新鮮蒸餾水 | |
6、酶等試劑混用 | 不同批號(hào)試劑勿混用 | |
7、一次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本量過(guò)多,加樣時(shí)間太長(zhǎng),導(dǎo)致實(shí)際反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng) | 合理安排實(shí)驗(yàn),避免幾塊酶標(biāo)板同時(shí)加樣 | |
ELISA試劑盒重復(fù)性不佳 | 1、樣品數(shù)量多少不一,加樣時(shí)間有長(zhǎng)有短 | 重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與*次接近 |
2、保溫時(shí)間不*,洗滌條件不*,操作人員不* | 重復(fù)測(cè)定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持*,以排除這些因素造成的不*的可能性 | |
3、加樣量不* | 樣品稀釋前應(yīng)充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴 | |
出現(xiàn)白板,陽(yáng)性對(duì)照不顯色 | 顯色液變質(zhì) | 更換新的顯色液 |
洗滌液配制有誤 | 請(qǐng)按說(shuō)明書(shū)所示稀釋倍數(shù)配制 | |
未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入 | 注意不要漏加 | |
終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜镆菏褂?/p> | 每次加液前均應(yīng)看清標(biāo)簽 |
五、常見(jiàn)問(wèn)題解答
小編簡(jiǎn)單整理了5個(gè)問(wèn)題,具體內(nèi)容如下:
1、一個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)幾個(gè)樣品?
小編自己在各大論壇看到zui多的三個(gè)答案:
1)48T 可做42個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線;96T 可做90個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線
2)以96T試劑盒來(lái)算,定量的試劑盒一般可以做90個(gè)左右的樣品,定性的試劑盒可以做94個(gè)左右的樣品
3)96T的ELISA試劑盒,去除標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔檢測(cè),zui多還能檢測(cè)80個(gè)標(biāo)本;48T的zui多30個(gè)樣本。
2、elisa試劑盒96T的能做檢測(cè)多少血清樣品?板能重復(fù)利用嗎?
96T,一般做復(fù)孔的話,做標(biāo)準(zhǔn)曲線需要16個(gè)孔,剩下80個(gè)孔就可以做40個(gè)樣本。這個(gè)板不能重復(fù)利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。
3、想請(qǐng)教一下,我想用elisa法測(cè)血清里的一種抗原,查了資料,發(fā)現(xiàn)沒(méi)有現(xiàn)成的試劑盒用,現(xiàn)在就有2種備選方案,一種是買抗體對(duì)自己包被(查了R&D等大公司都沒(méi)有可用于elisa的單抗)。哪種比較好呢?自己包被的會(huì)不會(huì)比國(guó)產(chǎn)的試劑盒可靠呢?
如果你覺(jué)得技術(shù)不錯(cuò)有隊(duì)其他公司不放心,可以自己購(gòu)買抗體對(duì)自己包被,這個(gè)就是麻煩點(diǎn),自己包被用著放心,舒心;
另外國(guó)內(nèi)還是有一些資質(zhì)不錯(cuò)的公司,如上海恒遠(yuǎn),上海恒遠(yuǎn),上海滬鼎等等
4、western 和ELISA 處理樣本有何差別?
Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制劑),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,即得到蛋白樣品。建議直接電泳,多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量,一次性用完一支,避免反復(fù)凍融。
ELISA樣品,直接腦組織冰上勻漿,收集于EP管,同上一樣離心,大約220-250ul每支分裝(因?yàn)镋LISA上樣量基本都是每孔100ul,做復(fù)孔,每個(gè)樣品2孔,就需要200ul,為了避免不夠2孔,分裝時(shí)要大于200ul每支),直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存,一樣避免反復(fù)凍融。
不過(guò)ELISA少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),或者查閱文獻(xiàn),看看大概組織里有多高濃度,選擇合適的試劑盒,測(cè)量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過(guò)高測(cè)量不準(zhǔn),或者濃度過(guò)低,小于試劑盒zui低可測(cè)濃度。
5、Elisa試劑盒該買哪家公司的呢?
提出這個(gè)問(wèn)題的朋友其實(shí)該打,目前上各個(gè)品牌的試劑盒生廠商,都會(huì)有其偏重點(diǎn),像R&D在細(xì)胞因子方面的試劑盒就非常牛逼,而其他牌子也一樣的。
Bender:粘附分子方面的試劑盒;
Cayman:花生四烯酸類產(chǎn)品的試劑盒;
Merck(Linco):內(nèi)分泌研究方面的試劑盒;
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