IAP,豬免疫抑制酸性蛋白ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豬免疫抑制酸性蛋白（IAP）的含量。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被豬免疫抑制酸性蛋白（IAP）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬免疫抑制酸性蛋白（IAP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

標(biāo)本要求

1. 血清：溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或其他作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

3. 尿液：無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

問題解答

Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照解析

Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照：陰、陽性對照若有正確的結(jié)果，對試劑盒操作的結(jié)果可以有粗略的判斷。

空白對照：對ELISA試劑來說，空白對照實(shí)際上是不加標(biāo)本不加酶做對照?？瞻讓φ罩饕獪y系統(tǒng)的吸光率?？瞻讓φ赵趩尾ㄩL測量時(shí)顯得尤其重要

我司代理幾千種ELISA試劑盒，數(shù)萬種抗體，并代理產(chǎn)品近萬種，涉及分子生物學(xué)、分子免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。為了節(jié)省您的時(shí)間，我們還可以提供代檢測服務(wù)。

注意事項(xiàng)

1. 由于底物顯色劑對光及其敏感，因此要避光保存。

2. 檢測吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開，將其預(yù)熱30min以上。

3. 孵育的時(shí)間應(yīng)該嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時(shí)間為準(zhǔn)。

4. 要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的精密度。

5. 對樣本的結(jié)果有疑問時(shí)需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗(yàn)證。

代測服務(wù)

客戶以快遞形式送標(biāo)本，上海市內(nèi)客戶代測樣本可享我司上門取樣服務(wù)。

本公司公布的試劑盒，可以提供代測服務(wù)。

本公司上尚未列出的試劑盒，可以代為研發(fā)和測定，費(fèi)用等相關(guān)信息咨詢。