IL-12小鼠白細(xì)胞介素12ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠白細(xì)胞介素12（IL-12）的含量。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被小鼠白細(xì)胞介素12（IL-12）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白細(xì)胞介素12（IL-12）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

二、“IL-12小鼠白細(xì)胞介素12ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)”標(biāo)本要求

    在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，有條件的，-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

三、我公司“”*優(yōu)勢：

1.嚴(yán)格的質(zhì)控體系：所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控，確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性；

2.產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有很好的靈敏度；

3.綜合指標(biāo)特性，研發(fā)便捷操作的試劑盒；

4.*分裝：專業(yè)的，可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，優(yōu)秀的產(chǎn)品質(zhì)量，低廉的市場價(jià)格，實(shí)惠、經(jīng)濟(jì)、可靠。

四、樣品收集、處理及保存方法

(1）血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

(2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

(3）細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

(4）組織勻漿-----將組織加入適量shengli鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

(5）保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

五、檢測前準(zhǔn)備工作:

1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正?，F(xiàn)象，可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。

3.  標(biāo)準(zhǔn)品: 加入標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本稀釋液1.0ml至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中，靜置10分鐘，待其充分溶解后，輕輕混勻(濃度為5000 pg/ml)。然后根據(jù)需要進(jìn)行倍比稀釋(注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度： 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

4. 生物素化抗體工作液：實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μl/孔計(jì))，實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制100-200μl。使用前15分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用。

5. 酶結(jié)合物工作液：實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μl/孔計(jì))，實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制  100-200μl。使用前15分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用。

六、操作注意事項(xiàng)

(1）試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

(2）實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

(3）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

(4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

(5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

(6）洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

(7）底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

(8）加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

(9）按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

七、客戶評論

1、賣家很耐心的解答，服務(wù)很好，產(chǎn)品也不錯(cuò)，好評！

2、收到很不錯(cuò)，包裝很好，沒有一點(diǎn)破損，賣家服務(wù)也很好，現(xiàn)在看了是做活動(dòng)的，價(jià)格也是很實(shí)惠的，值了！

3、這個(gè)質(zhì)量還不錯(cuò)，而且優(yōu)惠購買的挺實(shí)惠的！

4、好品質(zhì)，賣家服務(wù)更好！

5、好評，正品！產(chǎn)品非常好，發(fā)貨及時(shí)，包裝完好，非常滿意的一次購物！

6、銷售小錢的服務(wù)態(tài)度真好，發(fā)貨很快。商品質(zhì)量也相當(dāng)不錯(cuò)，太滿意了，謝謝！

7、包裝好，物流快，產(chǎn)品好，滿意！

八、產(chǎn)品訂購說明：

1.絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。

2.部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。

3.部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日價(jià)格為準(zhǔn)。

4.請辦理完后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、信息、等形式通知我們。

我公司ELISA試劑盒品種多，質(zhì)量好，靈敏度高，涉及的品牌有美國R&D BIM原裝/分裝等不同價(jià)格檔次的盒子。提供免費(fèi)代測服務(wù)，咨詢的詳細(xì)說明書。