ELISA實驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,但是真正到自己上手的時候還是會犯糊涂,出狀況!如何更好地運用ELISA試劑盒、掌握ELISA實驗?zāi)兀可虾:氵h(yuǎn)技術(shù)為您講解:如何靈活運用ELISA試劑盒?
1.對于一些小分子的檢測,一般來說,要用競爭法ELISA去檢測,也要購買采用這個方法的盒子。一般細(xì)胞因子的檢測,都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測,因為因子分子量比較大,一般10幾個KD左右,很容易找到兩個或者多個抗原表位。
而小分子很難找到兩個不同的表位,也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結(jié)合小分子并固相化。解決方案就是酶標(biāo)板上包被二抗,每個孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子,然后加樣品,再加不帶標(biāo)記的檢測抗體,顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。
2.還有一個問題,這是不是客戶的誤區(qū),就是拿來一個指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測。ELISA檢測方法簡單,靈敏度高,但是該檢測活性的檢測活性,該做western的做western。
上海恒遠(yuǎn)生物對ELISA的操作提醒:
1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
4.洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
5.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
要想熟練的靈活運用ELISA試劑盒,還需要多動手操作。在實驗中遇到相關(guān)技術(shù)問題,都可我司技術(shù)人員,上海恒遠(yuǎn)生物為您解答!