J亞群禽白血病抗體抗體檢測方法
亞群禽白血病是由, 亞群禽白血病病毒(J.\N/-.O , 04(0) 1*.:-+(+ 4(/.+,KH6A,)引起的一種主要導致肉用型雞發(fā)生髓細胞瘤的傳染病,該病自=>>= 年由307)* 在英國發(fā)現并報道以來[=],在世界范圍內廣泛流行,目前已遍布世界上所有的養(yǎng)雞國家,其中在美國、英國等國家肉種雞群中的感染率接近%$ ‘,給世界養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的經濟損失。我國自=>>> 年從市場上商品代肉雞中分離并檢出了KH6A,,現已在山東、江蘇、河南、寧夏、內蒙、吉林、黑龍江等省市分離到了多個KH6A, 病毒流行株[! ? #]。勿庸置疑,我國已經受到, 亞群禽白血病威脅,并造成了嚴重經濟損失。
亞群禽白血病在雞群中不僅可以水平傳播還可垂直傳播,導致感染雞群的死亡率升高、產蛋量下降、發(fā)生免疫抑制、帶來直接危害,另外免疫抑制還可嚴重影響禽流感等禽類烈性傳染病的免疫預防效果,降低禽只對各種病原體的抵抗力,從而引發(fā)更為嚴重的危害。因此,自該病在國內不同地區(qū)出現和流行以來,就引起了獸醫(yī)工作者和養(yǎng)禽生產者的高度重視。目前,現地生產中急需開展該病普查和凈化的技術手段。雖然,國外用于檢測,)0 : 2 囊膜蛋白$%&’ 的血清學診斷試劑盒已經商品化,但是因為$%&’ 存在著極為普遍的抗原變異,世界各地區(qū),)0 : 2 分離株$%&’ 的分子變異規(guī)律不盡相同,不能確保來自國外的血清學試劑盒在中國境內使用的效果,zui不容忽視的問題是國外試劑盒價格昂貴,使用成本較高,不易在國內大范圍推廣使用。為了解決上述問題,本研究立足國內生產需求,開展國內分離毒株$%&’ 的表達和純化研究,并以其為抗原,建立了用于檢測,)0 : 2 的血清學()*+, 診斷方法。
本研究建立的()*+, 診斷方法,經交叉試驗證實,具有良好的特異性,與其他禽類常見疫病的
陽性血清無交叉反應,特異性好;批內和批間重復試驗證實,抗體水平不同的各種血清樣品、在不同
時間進行檢測的;< 值變異程度不大,重復性和穩(wěn)定性較好。3"3 敏感性實驗的結果表明,+./ 雞攻毒后#- =即可檢測到()*+, 抗體,直到實驗進行到的第&’天仍然可檢測到抗體。檢測敏感性與國外試劑盒一致。
經對現地4 份血清樣品測定結果表明,()*+, 診斷方法與國外商品化試劑盒在不同雞群中的符合率zui低可達&7"4 9,zui高達到8’" ’ 9,符合率較好。3"’ 目前已有的研究結果及現地應用效果表明,本研究建立的間接()*+, 抗體檢測方法,具有特異、敏感、適用、成本合理等特點和優(yōu)勢。隨著技術手段的進一步完善、試劑盒組裝技術的開發(fā)和利用,2 亞群禽白血病()*+, 診斷方法將為國內
各養(yǎng)雞廠有效開展2 亞群禽白血病血清學調查提供有效的技術手段。同時,結合相應的病原學診斷方法,該方法也必將在也必將在2 亞群禽白血病的凈化中發(fā)揮巨大的作用。
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