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試劑盒資料研究結(jié)果發(fā)布

更新時(shí)間:2014-09-17   點(diǎn)擊次數(shù):923次

    新的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目已經(jīng)開始執(zhí)行策劃了,可能會(huì)有些實(shí)驗(yàn)新手面對(duì)ELISA的時(shí)候有些不知所措,在這之前掌握一些相關(guān)資料是肯定需要的,我公司在前面的文章里面也介紹過不少,今天上海恒遠(yuǎn)技術(shù)為您整理出了的試劑盒資料研究結(jié)果,一起來看下吧:
 1. 在成批手工檢測(cè)中,還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間不一致,對(duì)競爭法及定量檢測(cè)影響很大,不注意可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
 2. 加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。
 3. 洗滌是ELISA操作過程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,終止抗原抗體反應(yīng),除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。上海恒遠(yuǎn)建議可用洗板機(jī)洗板或手工洗板,前者洗滌質(zhì)量較好,各反應(yīng)孔洗滌效果均一,批內(nèi)、批間差異小,手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。
 4. 準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測(cè)讀儀(酶標(biāo)儀),比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測(cè)定反應(yīng)孔的吸光度值(A值)。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。
    我公司試劑盒提供免費(fèi)檢測(cè)服務(wù):使用上海恒遠(yuǎn)生物試劑盒,只收取試劑盒的費(fèi)用,其他輔助試劑全部免費(fèi)。我們將根據(jù)實(shí)驗(yàn)工作量和難易程度,雙方協(xié)定實(shí)驗(yàn)周期,保質(zhì)保量完成委托實(shí)驗(yàn),并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果和材料用特快專遞免費(fèi)寄送到您手中。
    
   本次的試劑盒資料中還包括了問題解決這一方面,我們首先來看下“邊緣效應(yīng)”這一問題。其實(shí)也就是外周孔顯色較 中心孔深。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體,在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,板也升溫時(shí),在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí),將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)”了,并且可提高測(cè)定的重復(fù)性哦! 
◇ 在ELISA實(shí)驗(yàn)中,血清為什么要稀釋? 
   1. 競爭抑制比較明顯,應(yīng)稀釋競爭物;
   2. 血清中含有的性腺激素比較低,應(yīng)該濃縮才對(duì)。
    血清稀釋用普通的PBS即可,可加1%的BSA,能有效降低ELISA本底,當(dāng)然如果你嫌麻煩我覺得用生理鹽水替代PBS關(guān)系也不大。不管你是用直接競爭還是間接競爭,血清的稀釋倍數(shù)肯定要事先確定,但也不用一點(diǎn)點(diǎn),你做一個(gè)預(yù)試驗(yàn)即可,選擇OD在1.0左右的稀釋倍數(shù),即你的競爭ELISA中陰性孔OD在1.0,這樣作出來的曲線比較敏感。
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     ELISA試劑盒預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、組織勻漿或其它相關(guān)生物液體中目標(biāo)蛋白含量。ELISA法由于本身所具備的*性,是一項(xiàng)很有發(fā)展前途的血清學(xué)診斷方法,應(yīng)用領(lǐng)域也越來越廣泛。可我們認(rèn)為ELISA不是萬應(yīng)良方。因?yàn)镋LISA法還是有局限性,ELISA中變異因素多,對(duì)于要診斷某一疾病時(shí),必須進(jìn)行一系列實(shí)驗(yàn)室預(yù)試,摸索,或?qū)嶒?yàn)研究,常用競爭法測(cè)定血清的溶度。
    了解更多ELISA試劑盒資料,歡迎您收藏本公司關(guān)注,可在本中留言,或者直接來電給上海恒遠(yuǎn)生物業(yè)務(wù)員也是可以的。
    

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