Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。如果選對了試劑盒,用對了實驗技巧,就會讓您的實驗效率事半功倍。
那么如何選購一款*,價格實惠的 ELISA Kit 呢?
大家都知道市面上任意品牌的一個 ELISA Kit 售價都不便宜,如果選錯了試劑盒,輕則損失一筆科研經費, 重則毀掉整個實驗課題.
如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要,有以下幾點可供參考。
1. 查找待測樣本的蛋白濃度:可通過 NCBI 的文獻,uniprot,pax-dab 上給出的蛋白表達量參考值來比較 ELISA 試劑盒中給出的樣本值與報道值是否一致。
2. 試劑盒的應用種屬、檢測樣本的種類:除試劑盒特別說明外,一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有:血清和血漿,細胞上清,和細胞裂解液。
3. 試劑盒的檢測范圍:也就是標曲范圍,特別要注意待測樣本濃度是否落在標曲范圍內,對于濃度很高的樣本,可以先進行預實驗摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測定樣本。
4. 試劑盒中的稀釋線性及回收率:
a. 稀釋線性一般指樣本稀釋線性,是將樣本梯度稀釋下來,看各稀釋梯度濃度是否成線性;參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的best佳稀釋倍數(shù);
b. 稀釋線性也有做加標稀釋線性的情況,加標稀釋線性是將標準品加入樣本中測定加入的標準品濃度測定是否準確;同樣也是確定待測樣本稀釋倍數(shù)的參考指標。一般線性和回收率的范圍在 80%-120% 比較合適;
5. 試劑盒的其它指標:
①特異性
ELISA 試劑盒的特異性與試劑盒的關鍵組分,抗體對有關。若抗體對中之一為多抗,另一個必須為單抗,建議使用雙單抗。
②靈敏度
靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質的低量的能力,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標的量選擇合適的試劑盒,如果待檢指標量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可選擇高敏的 ELISA 試劑盒。
③重復性
科學實驗講求重復性,一般 ELISA 試劑盒,其板內和板間變異系數(shù)應該控制在 15% 以內。
④簡便性
試劑盒在保證高質量數(shù)據(jù)的情況下,實驗時間越短,操作越便利,越容易受到用戶歡迎。這也不妨作為選擇試劑盒的一個指標。
⑤經濟性
可以選擇價格適中,排名度靠前,口碑好的,一個品牌不光要有度,更重要的是美譽度。通過行業(yè)調查公司以及網(wǎng)絡,相關宣傳資料等可以找到美譽度高的 ELISA 試劑盒供應商,這個反映的不僅是產品質量的問題,對供應商的售前售后服務也是一個非常嚴格的檢驗。